Наши наблюдения над кровью головастика натолкнули нас на построение новой гипотезы (предположения) о происхождении клеток не только из клеток, но и из живого вещества, не имеющего структуры клетки.

Необходимо было эту гипотезу проверить и доказать её достоверность. И мы приступили к изучению развития желточных шаров в яйцах кур, канареек, рыб и живого вещества просто построенных многоклеточных (гидр) и простейших животных (евглен).

^{Рис. 9 Желточные шары в подэмбриональной полости куриного зародыша, выпавшие из массы желтка}

^{Рис. 10. Выпадение желточных шаров в области зародышевого вала}

Наблюдения над развитием желточных шаров в курином яйце начались с изучения желточных шаров в подэмбриональной полости на различных стадиях развития куриного яйца. На стадии двух-трёхчасовой инкубации можно наблюдать в подэмбриональной полости желточные шары, плавающие в жидкости. В желточной же массе, вблизи от места расположения шара, имеются пустоты такой же формы и величины, как и лежащие поблизости в подэмбриональной полости желточные шары (рис. 9).

При взгляде на эту картину напрашивается мысль о выпадении шаров из желточной массы. Подобное же явление выпадения шаров можно видеть и в области зародышевого вала (рис. 10). По местоположению пустот в желтке легко видеть, что желточные шары выпали из желточной массы, а не из зародышевого диска. Уже одно это уничтожает основное возражение наших оппонентов, которые заявляли, что это не желточные шары, а отмирающие клетки, вывалившиеся из зародышевого

диска.

Если желточные шары, выпавшие в подэмбриональную полость, мы будем изучать на серии срезов, то ни в одном из таких шаров не удастся найти никаких следов ядра. Но если мы возьмём желточные шары на более поздней стадии инкубации, то можно видеть шары, в центре которых имеется место, свободное от желточных зёрен и заполненное мелкой протоплазматической зернистостью. Такой центр зернистости мы условно назвали «протоплазматическим ядром» (рис. И).

На этой же стадии или еще на более поздней стадии развития яйца можно найти новые особенности в таких выпавших шарах, а именно: в центре шара уже нет протоплазматического ядра, а имеется гомогенный (однородный) пузырёк и от него лучами расходятся нити, окрашивающиеся той же краской, как и центральный пузырёк. При изучении с очень большими увеличениями можно убедиться, что нити состоят из мелких протоплазматических зёрнышек, слившихся между собой (рис. 12 и 13). Далее мы находим шары с явно выраженным ядром, вполне оформленным (рис. 14). И, наконец, обнаруживаются шары в стадии сложного деления (рис. 15 и 16).

Для проверки своих наблюдений мы не ограничились гистологическими срезами куриного яйца и проверили наши наблюдения на искусственно оплодотворённых яйцах севрюги и в культуре желточных шаров, изолированных из куриного яйца.

Мы ставили культуру только из желточных шаров зародышевого вала, удалив зародышевый диск. Наблюдения производились через два, четыре, шесть часов, затем на другие сутки, через двадцать четыре, двадцать семь и тридцать часов после посева. Тотчас после посева на фото поле зрения было покрыто целиком желточными шарами. Они все имели вид однородных блестящих шаров (рис. 17).

Уже через два часа картина меняется: однородные шары становятся зернистыми и матовыми, зернистость в них находится в движении. При дальнейшем наблюдении наше внимание сосредоточивалось на шарах с мелкой зернистостью в протоплазме, находящейся в движении (рис. 18).

^{Рис. 11. Желточные шары с протоплазматическим ядром}

^{Рис. 12. Стадия развития желточного шара перед образованием ядра}

^{Рис. 13. Стадия развития желточного шара (большое увеличение)}

^{Рис. 14. Желточные шары с оформленным ядром}

^{Рис. 15. Желточные шары в стадии сложного деления}

^{Рис. 16. Желточные шары в стадии сложного деления (большое увеличение)}

Прежде всего в этих шарах удавалось наблюдать движение протоплазмы (табл. II, рис. 1—10). Одновременно с движениями протоплазмы в шаре происходит направленное движение зернистости; она собирается в центре шара и располагается лучами. Затем в центре лучей образуется блестящий пузырёк (табл. II, рис. 11–15), который растёт и наполняется зернистостью протоплазмы (табл. II, рис. 16–20). Образуется «зернистое ядро», в котором затем зернистость собирается с одной стороны и на глазах наблюдателя выбрасывается в протоплазму (табл. II, рис. 21–23). В ядре образуется ядрышко, зернистая протоплазма окружает всё ядро, и перед нами настоящая молодая клетка (табл. II, рис. 23, 24). Затем в такой клетке появляется ядро с ядерным веществом, и она делится кариокинетически (табл. II, рис. 25). Далее образуется целый слой клеток (табл, II, рис. 26).

^{Рис. /7. Культура желточных шаров только что после посева}

^{Рис. 18. Культура желточных шаров через несколько часов}

Картины, наблюдавшиеся нами в культуре прижизненно и затем на гистологических препаратах, приготовленных из этих культур, совершенно аналогичны (табл. III, А и В). И это сходство картин является очень ценным фактом, прекрасной проверкой верности наблюдений, получаемых при различных методах микроскопической техники.

Таким образом, уже эти наши наблюдения дают нам право считать, что наша гипотеза о происхождении клеток из живого вещества, в данном случае из желточных шаров, верна и уже можно говорить о закономерностях развития живого вещества до клетки.

Ввиду важности, серьёзности и новизны выдвинутой нами проблемы необходимо было проследить этот процесс

^{Таблица 11. Схема последовательных этапов развития клетки из желточного шара (1—25); 26—слой клеток, образовавшихся из желточных шаров}

^{Таблица III. Развитие клеток из желточных шаров:}

^{А — гистологические препараты; В — прижизненные наблюдения. 1. Снимок начала развития желточных шаров а, в и с\ 2. Снимок тех же шаров через 1 ч. 35 м.; шары а и с развиваются; 3, 4, 5. То же при дальнейших наблюдениях происхождений клеток из желточных шаров не отдельными этапами, а прижизненно на одном и том же шаре и зафиксировать этот процесс на фото.}

Для этой цели культуру, приготовленную из яйца двухчасовой инкубации, мы ставили в электрический термостат с постоянной температурой в 38 градусов, микрофотографическим аппаратом периодически делали снимки с одного и того же шара при увеличении в 600 раз.

Из опасения вредного влияния света на культуру пришлось отказаться от киносъёмки с частым освещением и фотографирование делать только через 1 час 35 минут. Этот метод позволил нам доказать, что взятая под наблюдение клетка образовалась не из другой клетки, а, вне всякого сомнения, из желточного шара (табл. III, рис. 1 и 2). Оба снимка сделаны с одного и того же поля зрения и при одном и том же фокусном расстоянии. Доказательством тому служит то, что мельчайшие зёрнышки между двумя шарами, а также и другие подробности в поле зрения сохранились и на первом и на втором снимках.

Изучая эти два снимка, можно установить, что на снимке 1 в правом углу имеются три желточных шара: а, в и с, без всяких признаков ядер. Несколько влево от центра лежит клетка-шар с зернистой протоплазмой, с почти гомогенным (однородным) ядром и ядрышком.