В каждом из сосудов выращивались растения ананаса; опыт длился 15 месяцев. Оценка влияния различных вариантов производилась путем измерения надземной части растений ананаса и общей длины их корней. Во всех сосудах, где почва была заражена личинками нематоды, рост надземной части растений был ослаблен в результате повреждения нематодами. В варианте 2 (где в почву вносили только нематоды) надземная часть была на 40% меньше, чем в варианте 1 (без нематод). В варианте 4 (внесение одной стерильной питательной среды) надземная часть была меньше на 34%, тогда как в варианте 5 (нематоды и Dactylella ellipsospora) она была меньше только на 28%. Уменьшение общей длины корней в результате поражения нематодами в вариантах 2, 4 и 5 составляло 73, 69 и 57% соответственно.

Остальные 5 видов грибов, использованные в опыте, по-видимому, никакого влияния не оказывали. Из приведенных цифр видно, что из 6 видов грибов, подвергшихся испытанию, только Dactylella ellipsospora снизила вредоносность нематод, и то в слабой степени. Результаты оказались обескураживающими, но впереди предстояло еще много работы. Выше уже указывалось, что распространенные в природе хищные грибы в изобилии встречались в почве, зараженной корневой галловой нематодой; поэтому Линфорд обратил теперь свое внимание на возможность разработки способа стимулирования их активности; если бы удалось использовать для борьбы с нематодами грибы, уже имеющиеся в почве, то отпала бы необходимость добавления к ней грибных культур.

Было установлено, что в результате смешивания с почвой свежего зеленого растительного материала численность безвредных свободноживущих нематод резко увеличивалась; так, например, в одном опыте через 14 дней после внесения в почву зеленых растений численность нематод увеличилась в 65 раз по сравнению с исходным количеством. Но через 21 день популяция нематод резко уменьшилась в числе, тогда как хищные грибы в этой же почве достигли обильного развития. По-видимому, усиление активности грибов более чем компенсировало увеличение численности нематод.

В период усиления активности грибов количество личинок нематод, паразитирующих на растениях, уменьшалось. Линфорд провел ряд лабораторных и тепличных опытов с внесением измельченных растений ананаса в почву, естественно зараженную корневой галловой нематодой. Эта серия опытов показала, что в каждом варианте было получено значительное снижение численности личинок паразитических нематод; статистический анализ опытных данных подтвердил достоверность полученных результатов.

Помимо использования в этих опытах измельченных растений ананаса, были проведены такие же опыты с измельченными зелеными листьями злака Panicum barbinoda; внесение их также обеспечило значительное снижение численности личинок корневой галловой нематоды, хотя результаты были получены несколько худшие, чем при использовании растений ананаса.

Эти наблюдения были поистине замечательны, и Линфорд предположил, что они могут объяснить положительные результаты, полученные некоторыми работниками при внесении зеленого удобрения в почвы, зараженные корневой галловой нематодой.

Для получения более точного представления о стимулирующем действии растительного материала на хищные почвенные грибы Линфорд и его сотрудники провели серию опытов по изучению результатов применения различных способов, воздействуя на почву в тщательно регулируемых условиях. В этих опытах почву брали с участка, сильно зараженного корневой галловой нематодой, и помещали в широкогорлые стеклянные банки емкостью 4,5 л. Взвешенные количества испытуемого органического вещества вносились в соответствующие сосуды и тщательно смешивались с почвой путем встряхивания и вращения сосудов.

Пока шел процесс разложения органического вещества, отверстия банок были закрыты муслином; через определенные промежутки времени сосуды с их содержимым взвешивали и потери веса компенсировали путем добавления воды. Вначале вели ежедневную регистрацию температуры почвы, пользуясь для этой цели термометрами, шарики которых помещали в центр поверхности почвы в двух сосудах каждого варианта, но так как в процессе разложения наблюдалось очень слабое согревание, которое быстро проходило, то в дальнейшем от этой процедуры отказались.

Сосуды содержались в одинаковых условиях в течение определенного срока времени, пока шло разложение органического вещества. Затем почву из каждого сосуда вынимали, тщательно перемешивали и, разделив на четыре равные части, насыпали в цветочные вазоны, в которые затем высевали семена коровьего гороха (Vigna sinensis).

Коровий горох служил растением-индикатором, так как этот вид поражается той же корневой галловой нематодой, что и ананас; в вазоне можно значительно быстрее вырастить коровий горох, чем ананасы, а так как растения его гораздо мельче, то в одном вазоне удается вырастить по нескольку экземпляров. Между 30-м и 35-м днями после посева проростки коровьего гороха вынимали из почвы, отмывали их корни и подсчитывали на них число галлов, образованных корневой нематодой.

Для разрешения этого вопроса было поставлено 5 отдельных опытов; каждый из них должен был осветить данную проблему с особой точки зрения.

В этом опыте испытывались 3 различных органических вещества: сахар, измельченный ананас и измельченные листья грубостебельного злака Panicum barbinode. Для испытания каждого из них было взято по 4 сосуда; кроме того, 4 сосуда, в которые вносили только воду, служили контролем. Таким образом, всего в опыте было использовано 16 сосудов.

Через 10 недель, в течение которых шло разложение органического вещества, через стеклянные стенки сосудов, куда был внесен сахар, можно было увидеть множество нематод; в сосудах с измельченными ананасом и злаком нематод было значительно меньше, а в контрольных их совсем не было. Нематоды принадлежали преимущественно к свободноживущим, непаразитическим видам.

Процесс разложения органического вещества длился в течение 12 недель, после чего почву перенесли в вегетационные сосуды и высеяли в них семена коровьего гороха. Одновременно с этим из всех сосудов были взяты пробы почвы для исследования. Оказалось, что в сосудах трех серий опыта с внесением органического вещества нематоды были гораздо многочисленнее, чем в контроле; из хищных грибов, уничтожающих нематод, были обнаружены 4 различных вида в сериях опытов с внесением ананаса, 3 вида в опытах с внесением злака; в сосудах с внесением сахара и в контроле ни одного вида хищных грибов не было найдено.

При исследовании проростков коровьего гороха, выращенных в почве из различных сосудов, выявились резкие различия в результате разных обработок. На проростках, выращенных на почве, к которой добавлялись ананас и злак, галлов было значительно меньше, чем на контрольных растениях; к сожалению, в опытах с сахаром всходы коровьего гороха погибли вскоре после прорастания, так что в данном случае сравнение оказалось неосуществимым.

В конце опыта почву каждой серии, состоявшей из 4 небольших сосудов, в которых был выращен коровий горох, ссыпали в один более крупный сосуд и высадили в него черенок ананаса. Через 10 месяцев оказалось, что ананасы, выросшие на почве, содержавшей органическое вещество, были развиты значительно лучше контрольных растений как в отношении веса надземной части, так и по протяженности и состоянию их корневых систем.

В этом опыте изучалось влияние различных количеств измельченного ананаса с целью выяснения вопроса о том, какое количество свежего растительного материала даст наиболее эффективные результаты.

Опыт был поставлен по той же схеме, что и предыдущий, и состоял из 6 вариантов. На каждый вариант было взято 4 сосуда емкостью по 4,5 л, так что всего в опыте участвовало 24 сосуда. В одной серии из 4 сосудов к почве ничего не добавляли, и она служила контролем; в сосуды второй серии добавляли только воду, не внося растительного материала; эти сосуды служили также контролем при уточнении вопроса о том, что определяет описанное выше действие растительного материала — вода, содержащаяся в растениях, или органическое вещество. В сосуды остальных четырех вариантов добавляли измельченные целиком растения ананаса в количестве 100, 200, 300 и 400 г на сосуд.