Пока Линфорд и его коллеги заканчивали свои опыты с галловой нематодой, повреждающей ананасы, во Франции было начато исследование других проблем, связанных с использованием хищных грибов в борьбе с нематодами. Первые результаты этой работы появились в 1939 г., после чего исследования продолжались еще в течение 5 лет. Ведущая роль в этих исследованиях принадлежала профессору Е. Рубо (Институт Пастера в Париже) и работавшим вместе с ним Ж. Деказо, Р. Дешьену, Л. Лами и Э. Вотрену.

Французские исследования проводились главным образом в лабораторных условиях и в меньшей степени в полевых, хотя и были проведены два опыта по борьбе с нематодами — один с корневой галловой нематодой на бегонии, другой — с нематодой, паразитирующей у овец. Нематоды, поражающие животных, относятся к совершенно иной ветви рода Nematoda, чем свободноживущие и паразитирующие на растениях формы, но между этими группами существует родственная связь, и обе они подвергаются нападению хищных грибов.

Французские исследователи были особенно заинтересованы в использовании хищных грибов с ветеринарной точки зрения для борьбы с некоторыми более мелкими паразитическими нематодами у овец, крупного рогатого скота и лошадей. Такие паразиты могут вызвать серьезные потери среди сельскохозяйственных животных; заражение ими происходит при выпасе животных на зараженных пастбищах. К началу указанной работы никаких данных о существовании хищных грибов, истребляющих нематод — паразитов животных, еще не было известно, поэтому французам прежде всего предстояло доказать, что такие явления вообще возможны.

Французские ученые использовали в своих опытах только три вида грибов: Arthrobotrys oligospora (клейкие сети), Dactylella ellipsospora (клейкие выросты) и D. bembicodes (сжимающиеся кольца). Грибы выращивались в чистой культуре на питательном агаре, а затем изобретались различные способы введения нематод в эти культуры. Один остроумный метод основан на приготовлении навозных культур нематод; для этой цели экскременты зараженных лошадей смешивали с древесным углем и увлажняли водой. Грибы Arthrobotrys oligospora и Dactylella bembicodes были выращены в чашках с навозным агаром, т. е. на питательном агаре, приготовленном на настое экскрементов. Когда грибы разрастались настолько, что закрывали всю поверхность агара, крышку с чашки снимали, а нижнюю часть чашки, содержащую грибы, перевертывали кверху дном над другой чашкой, в которой помещалось некоторое количество культуры нематод. Затем полоски фильтровальной бумаги располагали вертикально таким образом, чтобы их нижние концы соприкасались с культурой нематод, а верхние — с агаром, содержащим грибы. Личинки нематод из культуры на навозе использовали фильтровальную бумагу в качестве лестниц и взбирались по ней на агар, где их поджидали грибы.

Переселение нематод по бумажным лестницам достигало наивысшей интенсивности на 4-й день после установки такого аппарата. Грибы начинали реагировать на появление своих жертв примерно через 24 часа, образуя ловушки и захватывая личинок по мере их появления на агаре; через 3 недели все личинки из навозных культур мигрировали вверх по фильтровальной бумаге и были, конечно, выловлены и уничтожены грибами. При испытании описанным методом Arthrobotrys oligospora и Dactylella bembicodes оказались одинаково эффективными.

В некоторых последующих опытах эти же два вида грибов испытывались против нематод, паразитирующих в овцах и крупном рогатом скоте. В данном случае был применен другой метод. Грибы выращивались в жидких культурах, питательная среда представляла собой просто настой экскрементов без добавления агара. При введении личинок нематод в жидкие культуры грибы совершенно свободно уничтожали их, несмотря на непривычные окружающие условия, а поскольку грибы оказались высокоэффективными и в жидкой среде, возникло предположение о возможности использования их для «обеззараживания» воды, содержащей нематоды. Если подобный метод окажется осуществимым, это будет крупным шагом вперед, так как заражение животных часто происходит именно через питьевую воду.

Но не только нематоды, паразитирующие в лошадях и крупном рогатом скоте, послужили объектом французских экспериментальных исследований; в начале работы было проведено несколько опытов на личинках Ancylostoma duodenale, кишечного паразита человека, и Strongyloides fulleborni, нематоды из кишечника шимпанзе. В этих опытах применяли другую методику.

Культуры Dactylella ellipsospora (клейкие выросты) выращивали обычным путем на питательном агаре в чашках Петри, подмешивая к нему немного овсяной муки и солодового экстракта для питания грибов. Затем в культурах вырезали небольшие, размером примерно 2,2 кв. см, кусочки агара и оставшееся после них пространство заполняли водой, образуя таким образом «влажные камеры», которые французы назвали «logettes humides»[32]. Через 5—6 дней гриб разрастался на поверхности агара в чашках и гифы его достигали «влажных камер».

Нематод получали из навозных культур и помещали в описанные «влажные камеры»; было установлено, что через 3—4 дня на гифах, достигших камер, появлялись клейкие выросты, забиравшие в плен личинок нематод. Иногда нематодам удавалось сначала отрываться от клейких выростов, прилипавших к ним, но в конечном счете все они бывали выловлены и уничтожены.

Метод устройства «влажных камер» в агаре, на котором выращивались культуры, применялся с целью обеспечения влажности, достаточной для существования нематод, которые в противном случае не могли бы выживать в течение требуемого времени и служить достойной добычей для грибов.

Опыты с «влажными камерами» были повторены с использованием Arthrobotrys oligospora (клейкие сети) и Dactylella bembicodes (сжимающиеся кольца) в качестве испытуемых объектов и дали такие же положительные результаты. Вполне удовлетворительные результаты были получены и при испытании обоих этих грибов против Oesophagostomum bifurcatum, другого паразита обезьян, и против стронгилоидной нематоды, поражающей крупный рогатый скот.

В работе с нематодами, паразитирующими на животных, интересно отметить относительно крупные размеры некоторых из них, которых грибы тем не менее успешно уничтожали. Так, например, при работе с паразитами лошадей оказалось, что Dactylella bembicodes, Arthrobotrys oligospora и в несколько меньшей степени Dactylella ellipsospora успешно справляются с личинками Strongylus и Cylicostoma, достигающими длины до 1 мм. Если вспомнить, что диаметр гиф, несущих клейкие сети Arthrobotrys oligospora, не превышает 5 μ, то легко себе представить, что здесь имеет место своего рода подвиг, тем более что попавшая в плен нематода вовсе не является пассивной жертвой: она борется за свою свободу так же, как лосось, попавшийся на крючок.

Французские исследователи занимались не только ветеринарными проблемами; они провели некоторые интересные опыты и с нематодами, образующими корневые галлы на бегонии. Личинок этой нематоды можно легко добыть, вскрывая галлы, образуемые на корнях растений бегонии. Личинки помещали в чашки Петри в воду, в которую добавляли небольшие кусочки агаровой культуры Dactylella bembicodes. За 10 дней гриб уничтожил при помощи своих сжимающихся колец 90% всех нематод. Опыт был повторен с Arthrobotrys oligospora и Dactylella ellipsospora и дал такие же хорошие результаты, хотя эти два гриба действовали несколько медленнее.