Хищные грибы можно легко получить почти из всех типов гниющего растительного материала, например листового перегноя, садового компоста, гниющей древесины и т. д. Они обычно находятся также в навозе, а многие из них можно обнаружить в зарослях мха, особенно у основания стеблей, где растения соприкасаются с почвой.

Материал, собранный в поле, следует принести в лабораторию в закрытых сосудах (в пробирках или жестянках из-под табака), чтобы сохранить его влажность. После сбора его возможно быстрее следует использовать для закладки первичных культур. Если образцы достаточно влажны, их можно без опасения хранить в течение одной или двух недель, а более крупные образцы — и дольше. Если в течение одного обхода взято несколько образцов, то нужно следить за тем, чтобы в процессе сбора не занести хищные грибы или их споры из одного образца в другой; лопатка или нож, используемые при сборе, должны быть после каждого сбора тщательно очищены и, если возможно, протерты денатурированным спиртом. Лучше всего пользоваться шпателями из деревянных щепок, которые можно выбрасывать после взятия каждого образца. Если пробирки или жестянки раньше не использовались для сбора хищных грибов, их стерилизовать не нужно, но если они используются вторично, то их необходимо вымыть и простерилизовать путем кипячения или в автоклаве. Не следует забывать о том, что и руки сборщика также могут случайно занести материал из одного образца в другой.

Образцы следует этикетировать в момент сбора и, помимо этикетки на пробирке или коробке, хорошо вложить дополнительную этикетку внутрь пробы; если она будет написана карандашом, то независимо от степени влажности образца останется разборчивой. В полевую записную книжку следует записать время сбора, тип материала, место — предпочтительно со ссылкой на карту — и все другие детали, которые позднее смогут иметь какое-либо значение, например характер окружающей растительности, погодные условия и т. п. Просто поразительно, какое значение могут приобрести мелкие детали такого рода спустя годы после того, как образец был собран, исследован и забыт. Поэтому сведения об образце следует как можно скорее переписать из полевой книжки в более надежное место, потому что страницы полевой книжки почти неизбежно разрываются на этикетки для образцов, используются для разжигания трубки или иным путем оказываются потерянными для науки.

Для приготовления первичных культур хищных грибов из исходных образцов следует использовать бедную питательную среду для подавления роста более крупных видов плесневых грибов. Особенно низким должно быть содержание сахара. Хорошую среду можно приготовить на кукурузном агаре. Для этой цели берется: измельченных зерен кукурузы 20 г, агара 20 г и водопроводной воды 1000 мл.

Измельченные зерна кукурузы заливают 1200 мл водопроводной воды и нагревают в течение часа при температуре 70—80°. После охлаждения и оседания осадка 1000 мл жидкости, находящейся на поверхности, фильтруют, если нужно, через стеклянную вату, добавляют агар и расплавляют его в автоклаве. Литр среды удобнее всего разлить в 3 конические колбы емкостью 500 мл, которые затем закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин. под давлением 1 ат.

Слой агара в чашках для первичных культур хищных грибов не должен быть очень толстым (глубоким), так как это может затруднить последующие наблюдения; вопреки обычным правилам агар нужно заливать в колбы горячим, чтобы образующаяся при этом конденсационная влага предохранила его от слишком быстрого высыхания. Так как первичные культуры приходится выдерживать по крайней мере 3 месяца, то предохранение их от высыхания всегда является проблемой. Для сохранения влажности культуры полезно держать под колпаком или в закрытой жестяной коробке.

При закладке культур небольшое количество собранного материала помещают в середину слоя агара при помощи стерильного скальпеля или пинцета. В тех случаях, когда одновременно закладывают культуры из нескольких образцов, удобно иметь под рукой широкогорлый сосуд с денатурированным спиртом; между взятием материала из различных образцов пинцет стерилизуют, для чего его обжигают, а потом охлаждают, погружая в спирт, который быстро выгорает при последующем использовании пинцета.

Число чашек Петри, инокулируемых из каждого образца, зависит от того, сколько времени будут вестись последующие наблюдения. Полагается ставить не меньше 3 чашек; использование больше 12 штук не дает никаких преимуществ, за исключением случаев особенно исчерпывающего изучения какого-либо образца; в таких случаях количество чашек может исчисляться сотнями. Однако интенсивные исследования подобного рода лучше предоставить специалистам.

При исследовании почвы на содержание хищных грибов культуры закладывают иным способом. Небольшое количество почвы, подлежащей исследованию, рассыпают по дну пустой стерильной чашки Петри; агар, предварительно охлажденный примерно до температуры его затвердевания, наливают сверху почвы, после чего агар и почву осторожно перемешивают. Агар, применяемый в этих случаях, должен содержать очень мало питательных веществ. При использовании агара, приготовленного по вышеприведенному рецепту на кукурузной муке, кукурузный отвар следует до добавления агара разбавить по крайней мере 3 частями воды. Вместо кукурузного отвара лучше даже использовать слабый настой экскрементов кролика.

При выделении хищных грибов из почвы часто оказывается, что в культурах или мало нематод или совсем их нет. Так как способность хищных грибов конкурировать с плесенями обусловливается их плотоядным образом жизни, то отсутствие добычи может помешать их появлению в культуре. Поэтому почвенные культуры следует обеспечить нематодами. Нематоду Ditylenchus dipsaci можно легко получить, намочив в воде немного сухого растительного материала, содержащего этих нематод; вылупляющихся личинок можно выделить из частиц материала при помощи сепаратора Бэрмана. Этот прибор представляет собой обычную воронку для фильтрования с куском резиновой трубки и зажимом. Материал, содержащий нематод, завертывают в кисею и помещают в воронку, которую заполняют водой. Прибор оставляют в таком положении на 24 часа; за это время нематоды проходят через материю и спускаются в нижний конец резиновой трубки, откуда их можно извлечь, ослабив зажим. Другой способ получения нематод для стимулирования активности грибов состоит в содержании культур нематод на агаре, приготовленном на экскрементах кролика; в основном этот способ хорош, но иногда может подвести исследователя в самый ответственный момент.

Первичные культуры, полученные вышеописанными методами, содержат при комнатной температуре и периодически исследуют на содержание хищных грибов. В термостат их ставить не следует, так как относительно низкая температура более благоприятна для грибов. Свободноживущие хищные грибы обычно появляются довольно быстро, но иногда, особенно при недостатке нематод, они могут встречаться только небольшими группами. Иногда их можно распознать по спорам, которые часто бывают видны на концах воздушных конидиеносцев, вырастающих из материала, использованного в качестве инокулума; поэтому каждый раз, как производится осмотр культуры, следует тщательно осмотреть при слабом увеличении микроскопа и инокулум.

Свободноживущие хищные грибы могут появиться через несколько дней после постановки культуры, но нередко появление их задерживается; поэтому выбрасывать культуры можно не раньше, чем после трехмесячного периода наблюдений.

Гораздо труднее обнаружить внутренних паразитов нематод, например Harposporium. Для этого нужно отыскивать мертвых нематод с выходящими из них гифами; при этом часто полезно бывает перевернуть чашку Петри и исследовать культуру через ее стеклянное дно, так как нематоды, пораженные Harposporium и подобными ему грибами, часто, погибая, опускаются на дно агара и поэтому остаются незамеченными при наблюдении сверху. Для отметки местоположения обнаруженного экземпляра, который может понадобиться позднее для более детального исследования, рекомендуется при слабом увеличении микроскопа навести кончик пера автоматической ручки на то место стеклянного дна чашки Петри, под которым непосредственно лежит зараженная нематода; при слабом нажатии на кончик пера на стекле остается небольшое чернильное пятнышко, которое быстро высыхает и, подобно бую на воде, отмечает местонахождение нематоды.